,而會(huì)積聚在色譜柱內(nèi)。這樣色譜柱即成為涂漬了殘留物的色譜柱
,因而影響了溶質(zhì)在溶入固定相和洗出固定相的正確分配
。而且殘留物還會(huì)與活性溶質(zhì)相互作用,從而引起峰的吸附問(wèn)題(例如拖尾峰或峰面積減少)
;钚匀苜|(zhì)是指含有羥基(-OH) 或氨基(-NH) 以及某些硫醇基(-SH) 和醛的物質(zhì)。積聚在色譜柱內(nèi)的半揮發(fā)性污染物或殘留物,最終會(huì)被洗脫出去
。但需要幾個(gè)小時(shí)甚至幾天才完全從色譜柱中洗脫
。與不揮發(fā)性殘留物一樣,它們也會(huì)引起峰形和峰面積出現(xiàn)問(wèn)題
,此外
,通常還會(huì)引起很多基線(xiàn)問(wèn)題(不穩(wěn)定、偏離
、漂移
、鬼峰等。
10
、溶劑相極性不匹配
。較早流出的峰或靠近溶劑前沿的峰更容易出現(xiàn)拖尾,解決辦法:改變樣品溶劑
。
11
、不分流進(jìn)樣或柱上進(jìn)樣的溶劑效應(yīng)顯著。解決辦法:降低初始色譜柱溫度
。注釋?zhuān)菏贡A糁翟黾
,峰拖尾?huì)減弱。
12
、色譜柱安裝差使較早流出的峰更容易拖尾
。解決辦法:重新安裝色譜柱。
13
、液相:為減少拖尾
,可以選擇設(shè)計(jì)優(yōu)良的封端色譜柱,且使用象三乙胺(TEA
,較少需要)等添加劑
,或使用"極性"鍵合相。
14
、堿性化合物的峰拖尾可能是一個(gè)主要的色譜問(wèn)題
。峰拖尾降低了色譜效率以及結(jié)果的準(zhǔn)確性和精確性。造成峰拖尾的主要原因是分析物和硅膠表面的相互作用(圖1)
。這類(lèi)峰拖尾通常是由于硅膠表面存在的酸性硅醇基引起的
。硅膠中的痕量金屬也會(huì)增加硅醇的酸性和峰的不對(duì)稱(chēng)性。使用低酸性超純(99.995%) 硅膠可以減少或消除這些硅醇基的相互作用
。色譜的改善非常顯著。
15
、液相拖尾峰出現(xiàn)原因及解決辦法:
柱頭有空隙
。解決辦法:使用填料或玻璃珠填充柱頂部
柱上樣品超載。解決辦法:使用更高負(fù)載量的固定相
。增加色譜柱內(nèi)徑
、減少樣品量
、
單峰- 存在干擾性組分。解決辦法:凈化樣品
;預(yù)分離
存在未掃的死體積
。解決辦法:減少接頭的數(shù)量、確保進(jìn)樣器密封墊緊密
、確保接頭正確固定
堿性化合物- 硅醇相互作用
。解決辦法:換成聚合物固定相
堿性基質(zhì)- 硅醇相互作用。解決辦法:使用更強(qiáng)的流動(dòng)相或添加競(jìng)爭(zhēng)堿(例如
,三甲胺)
硅膠基- 柱降解
。解決辦法:使用特種色譜柱;聚合物柱或空間位阻