1.氣泡
由于HPLC系統(tǒng)中氣泡的存在 為了避免這類問題的出現(xiàn),HPLC實(shí)際分析過程中必須重視對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行脫氣處理;在HPLC系統(tǒng)開始工作前,可以用注射器連接恒流泵的排空閥 2.柱溫 在操作HPLC時(shí) 等度洗脫時(shí)溫度會(huì)影響保留時(shí)間 正如柱子不能完全平衡將導(dǎo)致保留時(shí)間的重現(xiàn)性差一樣 柱子里的溫度變化也會(huì)影響峰形。當(dāng)流動(dòng)相和柱子之間的溫差增大時(shí) 為了獲得一致的結(jié)果我們必須要控制柱溫,使用柱溫箱是最好的辦法 3. 色譜柱污染 色譜柱污染會(huì)引起保留時(shí)間漂移 樣品中如果存在色譜柱上保留很強(qiáng)的組分,就可能使保留時(shí)間漂移 避免色譜柱污染最簡單的方法是防患于未然 使用保護(hù)柱是個(gè)非常有效的方法 4.色譜柱平衡 如果我們觀察到保留時(shí)間漂移,首先應(yīng)考慮色譜柱是否已用流動(dòng)相完全平衡 5.流動(dòng)相有機(jī)溶劑 HPLC分析總要求使用HPLC純的試劑,關(guān)鍵是兩點(diǎn):純度高 流動(dòng)相有機(jī)溶劑可能影響HPLC的檢測(cè)限。 6.柱壓 柱壓過高是HPLC分析中常碰到的問題。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的問題。溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì),這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升 HPLC分析中